Aplicación de la tecnología crispr-cas9 en las estrategias de terapia del cáncer y las restricciones actuales de biotechticle ethan allen cerca de mí

En el siglo 21, la enfermedad del cáncer es la enfermedad más mortal en esta tierra debido al aumento en sus pacientes día a día. Y ahora es un reto para las ciencias médicas abordar este problema. Respecto a esto, hay cuatro pilares de la terapia del cáncer. Estos son: cirugía, radioterapia, quimioterapia e inmunoterapia. Sin embargo, la inmunoterapia es nueva en este campo y los científicos creen que la inmunoterapia es más avanzada que la quimioterapia porque supera la limitación de la quimioterapia. Cada terapia tiene ciertas limitaciones en comparación con la otra. La investigación continua y profunda en el campo de cáncer de ácido etacrínico, los investigadores encontraron que en inmunoterapia es susceptible de enseñar el sistema inmunológico a nivel molecular a través de la aplicación de tecnología de ADN recombinante (RDT). En los últimos tiempos, la inmunoterapia se basa en la aplicación de anticuerpos monoclonales para alterar la respuesta inmune mediante el bloqueo de los puntos de control inmunes entre las células T y las células cancerosas. La inmunoterapia con anticuerpos monoclonales se encuentra en etapa incipiente, pero también conlleva el riesgo de romper la tolerancia periférica. Por lo tanto, los científicos están tratando de utilizar la tecnología CRISPR / cas9 para interrumpir los genes que se emplearán en la formación de receptores en las células T. En este caso, la tecnología CRISPR / cas9 es la herramienta de edición del genoma que es susceptible de mutaciones knockout, knockdown y indels. Por lo general, esta tecnología se empleará para la edición de genes de células T. Sobre la base de la investigación y el desarrollo, la inmunoterapia se puede clasificar en:

Todas estas inmunoterapias tienen las mismas estrategias que mejoran la función de las células T contra las células cancerosas, que son fundamentales para la inmunoterapia. Por lo tanto, se trata de estrategias para mejorar la eficiencia de destrucción de células cancerosas de las células T. En este artículo, discutiremos la inmunoterapia basada en la tecnología CRISPR / cas9 en detalles en la forma de comprar ethereum coinbase de la herramienta de edición del genoma.

Observado por primera vez en E.Coli por el investigador de osaka yoshizumi ishino y sus colegas en 1987. Representa repeticiones palindrómicas cortas intercaladas regulatorias agrupadas y representa los loci que contienen múltiples repeticiones directas cortas (DR), y proporciona inmunidad adquirida a las bacterias y la arcea atacando a los virus. El sistema CRISPR se basa en crrna y tracrrna para el silenciamiento específico de la secuencia del ADN extraño invasor. La madre naturaleza es el océano o reservorio de las soluciones de los problemas. En la naturaleza, hay una guerra patológica entre bacterias y virus para la continuidad de la vida. Debido a esto, el sistema CRISPR / cas9 se ha desarrollado en bacterias y arqueas que proporcionan inmunidad adquirida (adaptativa) contra virus. De hecho, el sistema CRISPR / cas9 de las bacterias divide el ADN extraño a través de una pequeña división del ADN guiado por ARN. Sin embargo, es una parte del complejo sistema inmunitario adaptativo de las bacterias debido al proceso de transducción. CRISPR se convierte en un conjunto de herramientas indispensable en la investigación biológica. Una vez conocido como el sistema inmunológico adaptativo bacteriano de la enzima cas9, se sabe que está revolucionando diversos campos de la investigación médica, la biotecnología y el campo agrícola. La tecnología CRISPR / cas9 permite agregar, eliminar, alterar o alterar material genético en lugares específicos del genoma, desde procariotas hasta eucariotas. Por lo tanto, estas tecnologías son susceptibles de una alteración genética particular y hacen que para silenciarlas sea un gas sin etanol mejor para las cortadoras de césped. Los sistemas CRIPSR / cas9 de origen natural están altamente regulados y para cortar ubicaciones genómicas específicas de un sitio en el genoma de las bacterias y las arqueas. Componentes esenciales del sistema CRISPR / cas9

• g ARN: significa ARN guía. El ARN guía es una secuencia de ARN específica que reconoce la región de ADN objetivo de interés dentro del genoma y guía la nucleasa cas allí para editar la región de ADN particular de manera precisa. El grna se compone de dos partes: ARN crispr (crrna), una secuencia de 17-20 nucleótidos complementaria del ADN objetivo, y un ARN tracr, que proporciona una plataforma de unión para la nucleasa cas. Aquí, el ARN tracr contiene la nucleasa cas9. Sin embargo, es susceptible de modificación con respecto al gen o secuencia que se desee. Los paquetes de bioinformática (software y herramientas en línea) son esenciales durante las modificaciones genéticas o genómicas.

• cas9 – cas significa la nucleasa asociada a CRISPR. Es una endonucleasa no específica. Se dirige al locus de ADN específico por un grna, donde hace una ruptura de doble cadena y causa indels. Existen varias versiones de cas nucleasas aisladas de diferentes bacterias y arqueas. La más utilizada es la nucleasa cas9 de streptococcus pyogenes. Por lo general, los científicos de clasificación zurich se utilizan como modelo de nucleasa cas. Las nucleasas cas son enzimas y codifican de un gen específico. El gen de la nucleasa puede manipularse en la célula hospedadora del genoma que se va a editar, utilizando los vectores adecuados.

• Secuencia de PAM: el reconocimiento del ADN objetivo por la enzima cas9 está sujeto a la presencia de una secuencia corta de motivos adyacentes protospaciales (PAM) ubicada directamente en la cadena de ADN no dirigida en el gen del individuo al que se va a dirigir. Su secuencia de nucleótidos tiene una longitud de 3 nucleótidos. Si se realiza una coincidencia correcta, cas9 divide ambas cadenas de ADN de 3 a 4 nucleótidos en sentido ascendente del sitio PAM. Las secuencias de PAM son de naturaleza variable y específicas para nucleasas. El PAM para el cas9 más utilizado de streptococcus pyogenes es 5′-NGG-3 ‘, donde N es cualquier nucleótido como TGG, CGG, AGG y GGG. Sin embargo, las secuencias de PAM se encuentran en toda la vida del dominio, como archea, procarioa y eucaria. La incorrecta falta de coincidencia de nucleótidos entre el complejo de nucleasa grna-cas9 y el ADN dirigido causa la mutación del objetivo. Porque la nucleasa cas9 es una nucleasa inespecífica. Por lo tanto, la secuencia PAM reduce la mutación fuera del objetivo.

El proceso fundamental y la fidelidad del sistema inmunitario es distinguir el yo del no-yo. Algunas células del sistema inmunológico pueden reconocer las células cancerosas como anormales y matarlas. Desafortunadamente, esto puede no ser suficiente para combatir el cáncer por medios naturales de análisis de tendencias etereum. Necesita estimular las células T para matar la célula tumoral (célula cancerosa). El sistema inmunológico del cuerpo está estrechamente regulado y es demasiado inteligente, ya que puede abordar los productos de las células (células cancerosas) auto alteradas (generalmente proteínas) como neuroantígeno dentro de las células inmunitarias y las células inmunitarias del cuerpo lo reconocen como partículas extrañas. Neoantígenos (ligando alterado) se expresan en la superficie de las células cancerosas. El reconocimiento de un neo-antígeno como un cuerpo extraño por un APC induce una respuesta de las células T, y en consecuencia activa las células T y las células B. El cáncer que mata las células T en el cuerpo elimina la célula cancerosa con baja eficiencia. Se puede acelerar la eficiencia de destrucción de las células T utilizando diferentes estrategias. Esquemas básicos de la inmunoterapia para el tratamiento del cáncer.

La inmunoterapia aprobó recientemente el tratamiento del cáncer por la FDA y el cuarto pilar del tratamiento del cáncer después de la cirugía, la radioterapia y la quimioterapia. En el sistema inmunológico del cuerpo, las células inmunitarias, como las células B, las células T y las células presentadoras de antígenos (APC), los macrófagos constituyen partes integrales de los sistemas inmunitarios. El papel de las siguientes células en la respuesta inmune al cáncer:

Naturalmente, en el sistema inmunitario, la respuesta inmunitaria mediada por células T causa la muerte celular de las células cancerosas. Algún tipo de célula T destruye la célula tumoral dentro del torrente sanguíneo. Pero la población de células T y su eficiencia es muy baja. La respuesta inmune mediada por células T es susceptible de acelerar la eficiencia de destrucción de las células tumorales. La estrategia de los científicos es potenciar la función de las células T para la inmunoterapia. En 2018, el premio nobel en fisiología o medicina fue otorgado a James P. Allison y a tasuku honjo por su descubrimiento de la terapia contra el cáncer (inmunoterapia) mediante la inhibición de la regulación inmune negativa (inhibición del punto de control), que se basa en anticuerpos monoclonales. La inmunoterapia está aprobada por la FDA (administración de alimentos y medicamentos). James P. Allison, profesor de la universidad de Texas MD anderson cancer center en los EE. UU., Estudió una proteína, CTLA-4, que se sabe que reduce la eficacia de destrucción de las células T contra las células tumorales y la investigación de honjo mostró un resultado similar de la proteína La proteína PD-1 y causa el frenado de células T. Sin embargo, tanto la unión de CTLA-4 como la PD-1 a las células cancerosas tienen efectos negativos similares sobre la actividad de las células T. Funciones de las vías CTLA-4 y PD-1 en relación con el cáncer

Las vías CTLA-4 y PD-1 son parte de los puntos de control inmunitarios, en los que la escuela Ethel Walker es fundamental para los puntos de control inmunitarios en consideración de la modificación genética utilizando la tecnología CRISPR-cas9. Estas vías ayudan a regular la tolerancia periférica y a prevenir la autoinmunidad o la enfermedad autoinmune. Sin embargo, los receptores CTLA-4 y PD-1 son inducidos en las células T activadas, ya que se expresan en diferentes etapas de la respuesta inmunitaria. El receptor CTLA-4 está presente en las células T activadas (efectoras) y en las células Treg (expresión de constitución), pero el receptor PD-1 se expresa más en las células T activadas, las células B y las células mieloides. Mecanismo s de PD-1

El PD-1 es un receptor de la superficie celular y su ligando es PD-L1 y PD-L2. Promueve la auto tolerancia y regula a la baja las respuestas de células T mediadas. La unión de PD-1 inhibe la proliferación de células T y el interferón gamma (IFN-g), el factor de necrosis tumoral alfa (TNF-a) y la producción de IL-2, y reduce la supervivencia de las células T. Muchos tipos de células tumorales expresan el ligando PD-1 (rol del comité de ética de PD-L1) en su superficie y causan interferencias entre la respuesta inmunitaria y la tolerancia inmunitaria utilizando la ruta del punto de control inmunitario que paga la posibilidad de supervivencia de las células tumorales y las hace inmunes resistente. Tras la interacción de las células de superficie de las células tumorales PD-L1 con los receptores PD-1 en la superficie de las células T activadas, emiten una señal que inhibe las respuestas citotóxicas mediadas por células T contra las células tumorales y causa el debilitamiento del sistema inmunológico. Génesis de la inmunidad tumoral por PD-1

En el sistema inmunológico del cuerpo, el mecanismo de vigilancia inmunológica (del huésped) está estrechamente regulado. En el caso de las células tumorales, la vigilancia inmunológica tiende a perderse debido a las vías de señalización PD-1 / PD-L1 y los tumores escapan de la vigilancia inmunitaria del huésped mediante la expresión de PD-L1 (en la superficie de las células tumorales) que regula negativamente la respuesta inmunitaria al interactuar con la EP -1 en células T

La principal desventaja bien conocida es que CRISPR-cas9 puede provocar ediciones en el lugar equivocado en el genoma o dentro del gen, con efectos potencialmente dañinos. La aplicación de la tecnología CRISPR / cas9 para la edición de genes en humanos depende de la secuencia PAM. El reconocimiento del ADN objetivo por la enzima cas9 está sujeto a la presencia de una secuencia corta de motivos adyacentes protospaciales (PAM) ubicada directamente en la cadena de ADN no dirigida en el gen del individuo al que se va a dirigir. El ADN no dirigido puede ser un gen de mantenimiento, Secuencias reguladoras e incluso protooncogen (s). Si se hace una coincidencia incorrecta, entre la secuencia nucleasa y la secuencia PAM pueden dar una interrupción de secuencia no específica en todo el genoma. En otras palabras, este desajuste puede causar mutaciones fuera del objetivo y puede apuntar a la secuencia no específica. El efecto objetivo de la piratería ética no es tan importante, la selección de la guía correcta, el ARN y la PAM pueden jugar un papel crucial y no solo esto, el uso de diferentes conjuntos de grna pueden afectar en gran medida los efectos fuera del objetivo. Conclusiones:

La FDA aprobó la terapia actual del cáncer es la inmunoterapia. Existen varias formas de inmunoterapia, pero la inmunoterapia basada en anticuerpos monoclonales se aprobó en 2018, pero tiene el riesgo de romper la tolerancia periférica que puede causar enfermedades autoinmunes. Otro enfoque de la inmunoterapia es la tecnología CRISPR / cas9 que se puede acoplar con el sistema de terapia CAR (receptor de antígeno quimérico) -T, un tipo de terapia de transferencia de células adoptiva que puede proporcionar una respuesta inmune fuerte y deseada. Sin embargo, la inmunoterapia basada en CRISPR / cas9 todavía no está aprobada por la FDA. Referencias:

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